FC Zlín – FC Sellier & Bellot Vlašim (28.03.2025, 17:00)
Rozhodčí: Simon Vejtasa – Lukáš Lakomý, Pavel Pospíšil
Delegát utkání: Josef Bajer
Delegát svazový: Josef Dvořáček
1.SK Prostějov – FC Baník Ostrava B (28.03.2025, 18:00)
Rozhodčí: Stanislav Volek – David Žurovec, Jan Dohnálek
Delegát utkání: Milan Ondo
Delegát svazový: Ivo Chytil
MFK Vyškov – Slezský FC Opava (29.03.2025, 10:15)
Rozhodčí: Vojtěch Opočenský – Jan Váňa, Jakub Bureš
Delegát utkání: Zdeněk Duda
Delegát svazový: Jaroslav Beneš
MFK Chrudim – FK Varnsdorf (29.03.2025, 10:15)
Rozhodčí: Adam Trska – Martin Leška, Jaroslav Hádek
Delegát utkání: Adam Stodůlka
Delegát svazový: Miroslav Zlámal
FC SILON Táborsko – FK Viktoria Žižkov (29.03.2025, 15:00)
Rozhodčí: Ondřej Pechanec – Matěj Cichra, Václav Ježek
Delegát utkání: Jiří Neuberg
Delegát svazový: Miroslav Fišer
SK Líšeň 2019 – FC Vysočina Jihlava (29.03.2025, 15:00)
Rozhodčí: Antonín Bohata – David Zoufalý, Michal Novák
Delegát utkání: Ondřej Šišma
Delegát svazový: Jiří Adam
SK Sigma Olomouc B – SK Slavia Praha B (30.03.2025, 10:15)
Rozhodčí: Aleš Mach – Kamil Hájek, Michal Pfeifer
Delegát utkání: Jiří Trčka
Delegát svazový: Pavel Peřina
AC Sparta Praha B – FC Zbrojovka Brno (30.03.2025, 10:30)
Rozhodčí: Jan Beneš – Jaroslav Kubr, Adam Beneš
Delegát utkání: Martin Pech
Delegát svazový: Petr Hojsík