FC Vysočina Jihlava – FC Zbrojovka Brno (11.03.2022, 15:30)
Rozhodčí: Michael Kvítek – Michal Novák, Alexandr Černoevič
Delegát utkání: Petr Vysloužil
Delegát svazový: Pavel Peřina
MFK Chrudim – FK Dukla Praha (12.03.2022, 13:30)
Rozhodčí: Jan Machálek – Petr Antoníček, Lukáš Lakomý
Delegát utkání: Tomáš Farský
Delegát svazový: Dušan Pospíšil
1.SK Prostějov – FK Ústí nad Labem (12.03.2022, 14:30)
Rozhodčí: Tomáš Ulrich – Lukáš Matoušek, Jaroslav Hádek
Delegát utkání: Jiří Trčka
Delegát svazový: Jiří Adam
SK Líšeň 2019 – FC Sellier & Bellot Vlašim (12.03.2022, 14:30)
Rozhodčí: Tomáš Švagr – Stanislav Pochylý, Jaroslav Poživil
Delegát utkání: Kamila Muziková
Delegát svazový: Karel Vidlák
Slezský FC Opava – FK Fotbal Třinec (12.03.2022, 14:30)
Rozhodčí: Lukáš Raplík – Vít Melichar, Jakub Bureš
Delegát utkání: Michal Tandler
Delegát svazový: Milan Plesar
FK Viktoria Žižkov – AC Sparta Praha B (13.03.2022, 10:15)
Rozhodčí: Michal Křepský – Marek Podaný, Lukáš Slavíček
Delegát utkání: Emil Ubias
Delegát svazový: Tomáš Kovařík
FK Varnsdorf – 1.FK Příbram (13.03.2022, 14:30)
Rozhodčí: Petr Dorušák – Radek Kotík, Karel Mikeska
Delegát utkání: Martin Pech
Delegát svazový: Kryštof Mencl
FC MAS Táborsko – MFK Vyškov (13.03.2022, 14:30)
Rozhodčí: Jana Adámková – Radim Dresler, David Žurovec
Delegát utkání: Václav Andrejs
Delegát svazový: Luděk Lhoták