FC Vysočina Jihlava – MFK Vyškov (05.11.2021, 18:00)
Rozhodčí: Ondřej Berka – Lukáš Matoušek, Milan Vyhnanovský
Delegát utkání: Petr Vysloužil
Delegát svazový: Jaroslav Beneš
FK Fotbal Třinec – FC Sellier & Bellot Vlašim (06.11.2021, 10:15)
Rozhodčí: Ondřej Cieslar – Karel Mikeska, Michal Pfeifer
Delegát utkání: Ludvík Urbanec
Delegát svazový: Libor Zeman
MFK Chrudim – FK Ústí nad Labem (06.11.2021, 10:15)
Rozhodčí: Miroslav Zelinka – Jakub Bureš, Michal Volf
Delegát utkání: Radim Adamec
Delegát svazový: Miroslav Zlámal
FK Dukla Praha – FC Zbrojovka Brno (06.11.2021, 11:00)
Rozhodčí: Tomáš Klíma – Milan Flimmel, Lukáš Machač – Dominik Starý
Delegát utkání: Václav Andrejs
Delegát svazový: Ivo Chytil
Slezský FC Opava – AC Sparta Praha B (06.11.2021, 14:00)
Rozhodčí: Ondřej Pechanec – Zdeněk Dobrovolný, Alexandr Černoevič
Delegát utkání: Josef Bajer
Delegát svazový: Ladislav Míka
SK Líšeň 2019 – 1.FK Příbram (06.11.2021, 14:00)
Rozhodčí: Pavel Franěk – Jakub Šimáček, Jiří Pečenka
Delegát utkání: Miroslav Poklop
Delegát svazový: Pavel Peřina
1.SK Prostějov – FK Viktoria Žižkov (06.11.2021, 14:00)
Rozhodčí: Tomáš Švagr – Michal Novák, Petr Líkař
Delegát utkání: Zdeněk Duda
Delegát svazový: Petr Mikel
FC MAS Táborsko – FK Varnsdorf (07.11.2021, 14:00)
Rozhodčí: Dalibor Černý – Marek Podaný, Jan Dohnálek
Delegát utkání: Martin Pech
Delegát svazový: Jiří Kureš