FC Zbrojovka Brno – FC Sellier & Bellot Vlašim (29.10.2021, 17:00)
Rozhodčí: Pavel Orel – Lukáš Lakomý, Michal Pfeifer – Petr Hocek
Delegát utkání: Emil Ubias
Delegát svazový: Jan Zahradníček
FK Ústí nad Labem – FC MAS Táborsko (29.10.2021, 18:00)
Rozhodčí: Michael Kvítek – Lukáš Slavíček, Alexandr Černoevič
Delegát utkání: Zbyněk Rampáček
Delegát svazový: Radek Kocián
MFK Vyškov – MFK Chrudim (30.10.2021, 10:15)
Rozhodčí: Jan Machálek – Petr Kotalík, Jiří Pečenka
Delegát utkání: Jiří Trčka
Delegát svazový: Dušan Pospíšil
1.FK Příbram – FK Fotbal Třinec (30.10.2021, 14:30)
Rozhodčí: Josef Krejsa – Radim Dresler, Lukáš Matoušek
Delegát utkání: Kamila Muziková
Delegát svazový: Michal Beneš
1.SK Prostějov – SK Líšeň 2019 (30.10.2021, 14:30)
Rozhodčí: Lukáš Raplík – Milan Vyhnanovský, Michal Volf
Delegát utkání: Petr Vysloužil
Delegát svazový: Jiří Kureš
FK Viktoria Žižkov – FC Vysočina Jihlava (31.10.2021, 10:15)
Rozhodčí: Zbyněk Proske – Vít Melichar, Lukáš Machač
Delegát utkání: Martin Pech
Delegát svazový: Ivo Chytil
AC Sparta Praha B – FK Dukla Praha (31.10.2021, 10:30)
Rozhodčí: Tomáš Ulrich – Jaroslav Poživil, Jakub Bureš
Delegát utkání: Jiří Neuberg
Delegát svazový: Jan Král