FC Vysočina Jihlava – FK Varnsdorf (23.07.2021, 18:00)
Rozhodčí: Jan Petřík – Alexandr Černoevič, Milan Vyhnanovský
Delegát utkání: Jiří Neuberg
Delegát svazový: Ladislav Míka
FC MAS Táborsko – FC Zbrojovka Brno (23.07.2021, 18:00)
Rozhodčí: Zbyněk Proske – Jan Hurych, Michal Volf – Michal Křepský
Delegát utkání: Josef Bajer
Delegát svazový: Miroslav Zlámal
FK Fotbal Třinec – FK Ústí nad Labem (24.07.2021, 10:15)
Rozhodčí: Dalibor Černý – Jan Dohnálek, Zdeněk Dobrovolný
Delegát utkání: Ludvík Urbanec
Delegát svazový: Jaroslav Beneš
MFK Chrudim – AC Sparta Praha B (24.07.2021, 10:15)
Rozhodčí: Tomáš Batík – Jakub Mojžíš, Petr Líkař
Delegát utkání: Miroslav Poklop
Delegát svazový: Kryštof Mencl
FK Dukla Praha – MFK Vyškov (24.07.2021, 17:00)
Rozhodčí: Ondřej Cieslar – Jakub Šimáček, Lukáš Matoušek
Delegát utkání: Radim Adamec
Delegát svazový: Miroslav Zlámal
Slezský FC Opava – FC Sellier & Bellot Vlašim (24.07.2021, 17:00)
Rozhodčí: Karel Hanousek – Karel Mikeska, Jakub Bureš
Delegát utkání: Jiří Trčka
Delegát svazový: Pavel Peřina
SK Líšeň 2019 – FK Viktoria Žižkov (24.07.2021, 17:00)
Rozhodčí: Petr Hocek – Stanislav Pochylý, Michal Pfeifer
Delegát utkání: Václav Andrejs
Delegát svazový: Karel Vidlák
1.SK Prostějov – 1.FK Příbram (24.07.2021, 17:00)
Rozhodčí: Radek Dubravský – Michal Novák, Zdeněk Arnošt
Delegát utkání: František Hubička
Delegát svazový: Tomáš Kovařík