FK Fotbal Třinec – FK Blansko (22.05.2021, 15:00)
Rozhodčí: Petr Hocek – Jan Hurych, Karel Mikeska
Delegát utkání: Ivo Chytil
Delegát svazový: Lubomír Martinec
FC Hradec Králové – SK Líšeň 2019 (22.05.2021, 15:00)
Rozhodčí: Jan Petřík – David Hock, Dan Vodrážka – Tomáš Švagr
Delegát utkání: Václav Hartman
Delegát svazový: Karel Vidlák
1.SK Prostějov – FK Varnsdorf (22.05.2021, 15:00)
Rozhodčí: Miroslav Zelinka – Radim Dresler, Jakub Bureš
Delegát utkání: Martin Hrinko
Delegát svazový: Miroslav Liba
FK Ústí nad Labem – FK Dukla Praha (22.05.2021, 15:00)
Rozhodčí: Josef Krejsa – Martin Leška, Michal Novák
Delegát utkání: Josef Bajer
Delegát svazový: Dušan Pospíšil
FC MAS Táborsko – FC Sellier & Bellot Vlašim (22.05.2021, 15:00)
Rozhodčí: Jana Adámková – Zdeněk Dobrovolný, Michal Pfeifer
Delegát utkání: Jan Kořínek
Delegát svazový: Jiří Kureš
FC Slavoj Vyšehrad – FC Vysočina Jihlava (22.05.2021, 15:00)
Rozhodčí: Tomáš Ulrich – Petr Líkař, Milan Vyhnanovský
Delegát utkání: Miloslav Brtníček
Delegát svazový: Ladislav Dofek
MFK Chrudim – FK Viktoria Žižkov (22.05.2021, 15:00)
Rozhodčí: Jakub Vojkovský – Adam Horák, Alexandr Černoevič
Delegát utkání: Ladislav Kruliš
Delegát svazový: Miroslav Svoboda