SK Líšeň 2019 – FK Viktoria Žižkov (23.04.2021, 14:30)
Rozhodčí: Ladislav Szikszay – Jakub Hrabovský, Michal Volf
Delegát utkání: Miloslav Brtníček
Delegát svazový: Petr Vysloužil
FK Ústí nad Labem – FC Hradec Králové (24.04.2021, 16:00)
Rozhodčí: Tomáš Klíma – Zdeněk Vaňkát, Lukáš Slavíček
Delegát utkání: Václav Hartman
Delegát svazový: Kryštof Mencl
FK Dukla Praha – FC Sellier & Bellot Vlašim (24.04.2021, 17:00)
Rozhodčí: Lukáš Raplík – Jiří Pečenka, Jan Hurych
Delegát utkání: Jiří Neuberg
Delegát svazový: Martin Wilczek
FK Blansko – FC Vysočina Jihlava (24.04.2021, 17:00)
Rozhodčí: Alex Denev – Zdeněk Dobrovolný, Simon Vejtasa
Delegát utkání: Ludvík Urbanec
Delegát svazový: Karel Bohuněk
1.SK Prostějov – MFK Chrudim (24.04.2021, 17:00)
Rozhodčí: Emanuel Marek – Jan Paták, Adam Horák
Delegát utkání: Milan Ondo
Delegát svazový: Libor Zeman
FK Fotbal Třinec – FC Slavoj Vyšehrad (24.04.2021, 17:00)
Rozhodčí: Vít Zaoral – Petr Antoníček, Karel Mikeska
Delegát utkání: Stanislav Volek
Delegát svazový: Ladislav Míka
FK Varnsdorf – FC MAS Táborsko (25.04.2021, 17:00)
Rozhodčí: Pavel Julínek – Jaroslav Kubr, Petr Kotalík
Delegát utkání: Zbyněk Rampáček
Delegát svazový: Slavomír Kozel