FC Vysočina Jihlava – FK Fotbal Třinec (09.04.2021, 16:00)
Rozhodčí: Tomáš Batík – Marek Podaný, Petr Líkař
Delegát utkání: Josef Bajer
Delegát svazový: Pavel Peřina
MFK Chrudim – FK Ústí nad Labem (10.04.2021, 13:00)
Rozhodčí: Jan Petřík – Radim Dresler, Jakub Mojžíš – Vít Zaoral
Delegát utkání: Zdeněk Duda
Delegát svazový: Dušan Pospíšil
FK Dukla Praha – FK Varnsdorf (10.04.2021, 16:30)
Rozhodčí: Vít Nedvěd – Zdeněk Vaňkát, Milan Vyhnanovský
Delegát utkání: Václav Hartman
Delegát svazový: Miroslav Svoboda
FC Slavoj Vyšehrad – FC Hradec Králové (10.04.2021, 16:30)
Rozhodčí: Alex Denev – Matěj Vlček, Jaroslav Poživil
Delegát utkání: Radim Adamec
Delegát svazový: Slavomír Kozel
FK Viktoria Žižkov – FK Blansko (11.04.2021, 10:15)
Rozhodčí: Ondřej Cieslar – Karel Mikeska, Jakub Bureš
Delegát utkání: Miroslav Poklop
Delegát svazový: Kryštof Mencl
FC MAS Táborsko – 1.SK Prostějov (11.04.2021, 16:30)
Rozhodčí: Milan Matějček – Simon Vejtasa, Alexandr Černoevič
Delegát utkání: Michal Brutar
Delegát svazový: Libor Zeman
FC Sellier & Bellot Vlašim – SK Líšeň 2019 (11.04.2021, 16:30)
Rozhodčí: Tomáš Ulrich – Jan Hurych, Michal Volf
Delegát utkání: Miloslav Brtníček
Delegát svazový: Petr Hojsík